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魚(yú)胡蘿卜素ELISA檢測試劑盒(魚(yú)組織代測)

更新時(shí)間:2017-08-07      瀏覽次數:1234

本試劑盒用于體外定量檢測體液、腔液、組織勻漿及相關(guān)液體樣本魚(yú)胡蘿卜素carotene)的含量。

有效期:6個(gè)月

保存條件:2-8℃

 

試劑盒組成

 

名稱(chēng)

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8孔×12

8孔×6

無(wú)

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

無(wú)

樣本稀釋液

6mL

3mL

無(wú)

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

無(wú)

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

無(wú)

底物B

6mL

3mL

無(wú)

終止液

6mL

3mL

無(wú)

封板膜

2張

2張

無(wú)

說(shuō)明書(shū)

1份

1份

無(wú)

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

無(wú)

1.  標準品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0.25 μg/mL

2.  經(jīng)過(guò)大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實(shí)驗過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過(guò)zui大標準品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標本進(jìn)行適當稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗。

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.   樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

 

實(shí)驗結果計算

所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線(xiàn),并得到直線(xiàn)回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度。

 

試劑盒性能

  •  檢測范圍0.25 μg/mL  8 μg/mL。
  •  靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 μg/mL。
  •  特異性:不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。
  •  重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。

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