胰高血糖素樣肽1ELISA試劑盒，(人GLP-1酶免檢測)

實(shí)驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰高血糖素樣肽1（GLP-1）水平。用純化的人胰高血糖素樣肽1（GLP-1）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入人胰高血糖素樣肽1（GLP-1），再與HRP標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰高血糖素樣肽1（GLP-1）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中人胰高血糖素樣肽1（GLP-1）含量。

試劑盒性能：

1.樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值為0.95以上。

2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于10%和15% 。

檢測范圍：                                              

0.375 pmol/mL - 12 pmol/mL

靈敏度：                                              

低檢測濃度小于0.1 pmol/mL

操作步驟

• 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。
• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
• 測定：以空白孔調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

?本試劑僅供研究使用       目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中胰高血糖素樣肽1（GLP-1）的含量。