小鼠Elisa試劑盒檢測質(zhì)量保證是一個(gè)復雜的過(guò)程,許多重要的環(huán)節都影響到檢測的質(zhì)量。在實(shí)驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問(wèn)題,其直接的后果是對一些弱陽(yáng)性標本的檢測出現假陰性。
小鼠Elisa試劑盒檢測結果也是有三大條件的,下面就讓我們來(lái)具體看看是哪些吧!
一、固相載體
小鼠Elisa試劑盒檢測的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,醫學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)。除特殊情況外,在醫學(xué)檢修中均以血清作為檢測標本。加酶結合物應用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。每次加標本應更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。的試劑,良好的儀器和準確的操縱是保證小鼠Elisa試劑盒檢測結果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標本可直接進(jìn)行測定,有些則需經(jīng)預處理。
二、ELISA加樣步驟
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。凍結血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、血kuai收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說(shuō)來(lái),在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過(guò)一周測定的需低溫冰存??捎米鱁LISA測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份,小鼠Elisa試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時(shí)放回冰箱保留。
三、標本因素
血清標本可按常規方法采集,應留意避免溶血,紅細胞溶解時(shí)會(huì )開(kāi)釋出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,嚴格遵照劃定操縱,必能得出正確的結果。加樣時(shí)應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。