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如何改進(jìn)ELISA試劑盒在實(shí)驗中的錯誤呢?

更新時(shí)間:2021-07-07      瀏覽次數:749
  ELISA試劑盒有許多實(shí)驗操作步驟,新手操作難免出錯.其中許多錯誤是由不充分的細節造成的.有很多方法可以減少這種錯誤,比如在做實(shí)驗時(shí)少說(shuō)話(huà),以防止唾液掉進(jìn)酶的標簽中.當然,我們也要學(xué)會(huì )探索自己的問(wèn)題,找出原因.那么,我們如何改進(jìn)ELISA試劑盒實(shí)驗中的錯誤呢?
 
  1 評價(jià)試劑的實(shí)用性試劑的穩定性對準確度非常重要.在啟用試劑盒之前,應重復檢測陰性和陽(yáng)性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能使用.
 
  2 操作前仔細閱讀試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行標準化操作.不同批號的試劑不混合.值得改進(jìn)的是,只有經(jīng)過(guò)反復的試驗,如洗盤(pán)的數量,才能加以改進(jìn).
 
  3 加樣要準確 快速樣品添加的不準確度和酶制劑用量的不確定度直接影響顯色效果.此外,顯色深度和A值的確定與顯色劑和終液體的加入量有關(guān),因此樣品的裝載應謹慎.需要在一定時(shí)間內完成采樣的實(shí)驗,如果采樣速度慢,會(huì )出現誤差,試劑會(huì )暴露很長(cháng)時(shí)間,特別是當室溫過(guò)高時(shí),保質(zhì)期會(huì )縮短甚至失效.
 
  4 檢驗技術(shù)人員應具備實(shí)驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗.檢測技術(shù)人員能夠熟練操作實(shí)驗儀器儀表,具有一定的總結和分析問(wèn)題的能力,能及時(shí) 妥善地解決試劑盒實(shí)驗中出現的意外情況.
 
  5 洗滌要*洗版不*,酶偶聯(lián)物的背景顏色為假陽(yáng)性.此外,清潔劑應該是新鮮的,可以隨時(shí)使用.舊的洗滌劑會(huì )增加背景,也可能出現假陽(yáng)性.
 
  6 嚴控試劑盒實(shí)驗反應時(shí)間試劑盒反應時(shí)間過(guò)長(cháng),酶被滅活,反應時(shí)間過(guò)短,酶與血清中的微生物抗原和抗體不能*結合,產(chǎn)物結構松散不穩定,易清洗,易產(chǎn)生假陰性.
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