人TIMP-3ELISA檢測試劑盒實(shí)驗說(shuō)明書(shū)

樣本處理及要求：

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實(shí)驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

有以下操作技巧：

A、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

B、合理安排檢測量，以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。

C、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

D、要盡量做雙孔實(shí)驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的精密度。

E、樣品稀釋液應用加液器加注，并經(jīng)常校對其準確性。

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儲存條件和試劑盒準備：

1）有效期內的試劑如開(kāi)封后未用完，請2-8°C 保存。

2）過(guò)期的試劑請不要用，打開(kāi)后的試劑2-8°C 保存。

3）酶標包被板必須2-8°C 保存，如有未用完的酶標包被板，打開(kāi)的鋁箔袋須密封并2-8°C 保存。

4）試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。